Chromogeninės technikos taikymas atliekant bakterijų endotoksinų tyrimą

Chromogeninis metodas yra vienas iš trijų metodų, kurie taip pat apima gelio krešulio techniką ir turbidimetrinę metodiką, skirtą gramneigiamų bakterijų endotoksinams aptikti arba kiekybiškai įvertinti naudojant amebocitų lizatą, išgautą iš pasagos krabo (Limulus polyphemus arba Tachypleus tridentatus) mėlynojo kraujo.Jis gali būti klasifikuojamas kaip galutinio taško-chromogeninis tyrimas arba kinetinis-chromogeninis tyrimas, pagrįstas konkrečiu naudojamu tyrimo principu.

Reakcijos principas yra toks: amebocitų lizatas turi serino proteazės fermentų (profermentų) kaskadą, kurią gali aktyvuoti bakteriniai endotoksinai.Endotoksinai aktyvuoja profermentus, kad gamintų aktyvuotus fermentus (vadinamus koagulaze), pastaroji katalizuoja bespalvio substrato skilimą, išskirdama geltonos spalvos produktą pNA.Išsiskyrusi pNA gali būti matuojama fotometriškai esant 405 nm.Ir absorbcija teigiamai koreliuoja su endotoksino koncentracija, tada endotoksino koncentraciją galima atitinkamai įvertinti kiekybiškai.


Paskelbimo laikas: 2019-09-29